細(xì)胞出現(xiàn)問題，可重發(fā)的情況有哪些？判定是什么？

（1）細(xì)胞運(yùn)輸途中遭遇的各種問題，細(xì)胞丟失、破損、漏液等，重發(fā)；
（2）凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后，絕大多數(shù)細(xì)胞未存活，重發(fā)；
（3）存活的細(xì)胞靜置24小時(shí)后，絕大多數(shù)細(xì)胞未存活，重發(fā)；
（4）凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后或存活的細(xì)胞靜置4小時(shí)后并且未開封，出現(xiàn)污染，重發(fā)；
（5）視具體情況而定。
細(xì)胞出現(xiàn)問題，不予以重發(fā)的情況有哪些？
（1）客戶造成細(xì)胞污染，不重發(fā)；
（2）客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
（3）細(xì)胞狀態(tài)不好，未細(xì)胞前3天照片的，不重發(fā)；
（4）細(xì)胞時(shí)經(jīng)其它處理的，不重發(fā)；
（5）細(xì)胞收到2天內(nèi)，未告知，不重發(fā)；
（6）視具體情況而定。
LLC-PK1豬腎近曲小管上皮細(xì)胞說明書來源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等），活力>95%，貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細(xì)胞、新鮮原代細(xì)胞、原代細(xì)胞的分子學(xué)實(shí)驗(yàn)等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室，可無菌操作并提供相關(guān)科研項(xiàng)目解決方案以及實(shí)驗(yàn)服務(wù)。

形態(tài)：貼壁
細(xì)胞活力：95％（Viability by Trypan Blue Exclusion）
細(xì)胞檢測：細(xì)胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌
培養(yǎng)條件：DMEM/F12 +2% FBS；37℃，5% CO2
傳代方法：*建議1:2-1:3 兩天換液一次
凍存條件：90%FBS+10%DMSO
步驟是這樣:
1.從動(dòng)物胚胎或者一些剛出生的動(dòng)物的器官或者組織上取得細(xì)胞,配制成細(xì)胞懸浮液.把細(xì)胞液放到培養(yǎng)瓶中,在培養(yǎng)箱里培養(yǎng)--------原代培養(yǎng).
但是,不要以為這樣就能一直無限培養(yǎng)下去.
因?yàn)樵谀莻€(gè)瓶壁上生長的時(shí)候,如果大量增殖,細(xì)胞之間會彼此相碰,細(xì)胞細(xì)胞就會停止分裂增殖,出現(xiàn)一種接觸抑制.
2.我們?yōu)榱怂鼈兡芾^續(xù)增殖,就用胰蛋白酶再把它們分開,然后再配制成細(xì)胞懸浮液,分開裝到好幾個(gè)瓶子里繼續(xù)培養(yǎng)--------傳代培養(yǎng).

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購買我司細(xì)胞全程指導(dǎo)：
1)培養(yǎng)瓶有破裂，培養(yǎng)液有漏液：細(xì)胞極大可能會污染，所以我們會及時(shí)安排幫老師解決。
2)細(xì)胞漂?。号囵B(yǎng)瓶不開封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養(yǎng)箱。次日觀察，如細(xì)胞大部分又貼回瓶底，表明細(xì)胞活力正常，剩余漂浮的細(xì)胞可以去掉，留10ml培養(yǎng)液培養(yǎng)觀察，細(xì)胞生長至匯合度136%，進(jìn)行消化傳代;如細(xì)胞還是不貼壁，將細(xì)胞離心收集轉(zhuǎn)到新培養(yǎng)瓶，原培養(yǎng)瓶加部分培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)，中間注意觀察，我們的技術(shù)人員會一直跟蹤指導(dǎo)，直到問題解決。
血清的種類和品質(zhì)對于的生長會產(chǎn)生極大的影響，血清對細(xì)胞培養(yǎng)來說是一個(gè)極為重要的營養(yǎng)來源，血清使用錯(cuò)誤會造成細(xì)胞無法存活。造成細(xì)胞無法存活的還有培養(yǎng)基，每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基， 若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基， 細(xì)胞大都無法立即適應(yīng)。鉤吻GELSEMINE

N-α-芐氧羰基-L-2,4-二氨基丁酸N-alpha-Cbz-L-2,4-diamiobutyric acid

十六烷基三基化銨N-Hexadecyltrimethylammonium chloride

四基二硅氮烷1,1,3,3-TETRAMETHYLDISILAZANE

丙基胺酸ALLYLAMINE HYDROCHLORIDE

人參皂苷ROGinsenosideRo

N-乙基-N-(3-磺丙基)-3-氧基胺N-Ethyl-N-(3-sulfopropyl)-3-methoxyaniline sodium salt

溴丙Allyl bromide

三基磷(FORMYLMETHYLENE)TRIPHENYLPHOSPHORANE

異丁醇2-Methyl-1-propanol

桑黃素MORIN

叔醇Sodium tert-pentoxide

鈹粉BERYLLIUM

2-乙炔噻吩2-Ethynylthiophene

馬兜鈴酸B7-HYDROXYARISTOLOCHIC ACID A
LLC-PK1豬腎近曲小管上皮細(xì)胞說明書ApoB/Apolipoprotein B  載脂蛋白B抗體    * 0.1ml Loratadine

ORP8  氧固結(jié)合蛋白8抗體    * 0.2ml Loratadine

ALOX15B/15 Lipoxygenase 2  花生四15脂氧合酶2抗體    * 0.2ml Melatonine

APOB48R  載脂蛋白B受體抗體    * 0.2ml Melatonine

ARH/LDL receptor adaptor protein  低密度脂蛋白受體銜接蛋白抗體    * 0.2ml Minocycline hydrochloride

APOC4/Apolipoprotein CIV  載脂蛋白C4抗體    * 0.2ml Mitoxantrone HCl

HDLBP/vigilin  高密度脂蛋白結(jié)合蛋白抗體    * 0.2ml Mitoxantrone HCl

KAT13D/CLOCK  生物鐘KAT13D蛋白抗體    * 0.2ml Mitoxantrone HCl