KG-1急性髓系細胞白血病細胞

細胞基本屬性：

細胞詳細介紹：

傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)和生長密度，當細胞生長密度達到80%~90%時，即可進行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據培養(yǎng)瓶大小向瓶內加入適量含EDTA的，一般應覆蓋整個培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現有70%~80%細胞收縮變圓、細胞間隙變大時，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過度。

（5）吸出所有細胞懸液至離心管內，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細胞，輕輕吹打混勻，使細胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

（8）根據細胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間，甚至進行細胞凍存。

二、懸浮細胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實驗室中懸浮細胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細胞碎片的情況下）。當在顯微鏡下觀察到懸浮細胞已經長滿至80%~90%（細胞懸液變黃）時，即可進行傳代。

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HAoSMC-c 人主動脈平滑肌細胞(HAoSMC) 500,000cells 胰島β細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) 兔子組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)ELISA 試劑盒 IgG/PE-Cy7 PE-Cy7標記的驢抗豚鼠IgG 0.1ml

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ZR-75-30(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2 兔子組織多肽抗原(TPA)ELISA 試劑盒 IgM/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標記的兔抗豚鼠IgM 0.1ml

人腦微血管內皮細胞 大鼠信號轉導分子7(Smad7)ELISA 試劑盒 sTNF AlphaR(Human soluble Tumor Necrosis Factor Alphareceptor)  人可溶性壞死因子α受體 96T

MICB： MHC I類鏈相關蛋白B 0.1ml

Rhesus antibody Rh EST1A 端粒酶結合蛋白EST1A抗體 小鼠T淋巴瘤細胞(雞OVA基因修飾);E.G7-OVA

NCI-H2452(人間皮瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 L1210(白血病細胞) 大鼠信號轉導分子1(Smad1)ELISA試劑盒 GnRHR  大鼠釋放激素受體 96T

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KG-1急性髓系細胞白血病細胞TE671 subline No.2細胞，人橫紋肌肉瘤細胞 化膿性鏈球菌 轉PYTL基因小鼠支持細胞;15P-1 人附睪蛋白4(HE-4)ELISA試劑盒 EPOR peptide 紅細胞生成素受體抗原 0.5mg

HECT E3 ubiquitin ligase： HECT E3泛素鏈接酶抗體 JAG1 Others Human 人 JAG1 / JAGL1 / CD339 人細胞裂解液 (陽性對照)

兔主動脈平滑肌細胞;CCC-SMC-2 人封閉抗體(BA)ELISA 試劑盒 phospho-ERK1/MAPK-1/2(pThr183 + pTyr185) 0酸化原活化蛋白激酶1/2抗原 0.5mg

HDAC11： 組蛋白去乙?；?span>11抗體 EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KM933

LS-174T(人結腸腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 人 PRNP / Prion 人細胞裂解液 (陽性對照) 人風疹病毒抗體(RV-Ab)ELISA試劑盒 ERK(Extracellular signal-regulated kinase) 原活化蛋白激酶抗原 0.5mg

注意事項：

（1）嚴格進行無菌操作，所用一切試劑及耗材均應無菌，且須在無菌超凈工作臺中紫外照射30min以上，以免細胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細胞生存和生長。來源于不同動物種類、組織類型的細胞，對培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時可用預實驗的方法選擇適當的培養(yǎng)液。

（3）胎牛血清對于維持細胞生存，促進細胞生長起著關鍵作用?？筛鶕墨I或預實驗選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應保持用至實驗完成。

（4）消化細胞時應避免消化時間過短導致消化不收集到的細胞數量少，或消化時間過長導致細胞成團塊樣絮狀游離，這時的細胞已有損傷或死亡，影響細胞數量和實驗進度。

（5）細胞離心的時候應避免離心力過小收集的細胞數量不夠，或離心力過大對細胞產生損傷。離心后的細胞沉淀棄去上清后，應先彈散細胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打對細胞損傷小，可以提高細胞活率。

（6）吹打細胞時應盡量避免細胞的產生，以免損傷細胞，影響細胞狀態(tài)（吹打過程中殘留部分液體在吸頭內可以減少氣泡的產生）。