傳代培養(yǎng)操作步驟：
一、貼壁培養(yǎng)
細胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：
（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)和生長密度，當細胞生長密度達到80%~90%時，即可進行傳代。
（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。
（3）根據培養(yǎng)瓶大小向瓶內加入適量含EDTA的，一般應覆蓋整個培養(yǎng)瓶底。
（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現有70%~80%細胞收縮變圓、細胞間隙變大時，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過度。
（5）吸出所有細胞懸液至離心管內，1000rpm/min離心3~5min。
（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細胞，輕輕吹打混勻，使細胞均勻分散。
（7）用吸頭吸取適量細胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。
（8）根據細胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間，甚至進行細胞凍存。
ZR-75-1人乳腺癌細胞
細胞基本屬性：
產品名稱 | ZR-75-1人乳腺癌細胞（STR鑒定正確） | 年齡性別 | 女 |
種屬 | 人 | 組織來源 | 乳腺癌 |
細胞形態(tài) | 上皮細胞樣 | 生長特性 | 貼壁生長 |
重要提醒 | ZR-75-1細胞貼壁不牢，到貨時細胞飄起屬于正?，F象。待靜置貼壁后，操作應輕柔！處理時注意有無細胞飄起，避免因細胞未貼壁進行相關操作損失細胞！貼壁較慢，建議處理后48h內勿動。 | 凍存條件 | 無血清凍存液，液氮儲存 |
細胞詳細介紹：
細胞別稱 ZR751; ZR75-1; ZR75_1 背景簡介 ZR-75-1細胞產生高水平的黏液素MUC-1 mRNA，低水平的MUC-2 mRNA，但不表達MUC-3基因；ZR-75-1細胞表達雌激素受體。 STR位點 Amelogenin：X；CSF1PO：10，11；D13S317：9；D16S539：11；D18S51：13，14；D19S433：13，14；D21S11：31；D2S1338：16，25；D3S1358：15，16；D5S818：13；D7S820：10，11；D8S1179：11，13；FGA：20，22；TH01：7，9.3；TPOX：8；vWA：16，18； 細胞代數 10代以內 細胞規(guī)格 1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝 支原體檢測 無 培養(yǎng)基 RPMI-1640+10% FBS+1% P/S 培養(yǎng)條件 氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃ 凍存條件無血清凍存液，液氮儲 發(fā)貨方式復蘇發(fā)貨（免運輸費用）/ 凍存發(fā)貨（需加干冰運輸費用） 順豐快遞 供應限制僅限于科學研究，絕不可作為動物或人類疾病的治療產品使用 特別說明以下細胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產品說明書為主 |
二、懸浮細胞
傳代培養(yǎng)操作步驟如下：
一般實驗室中懸浮細胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細胞碎片的情況下）。當在顯微鏡下觀察到懸浮細胞已經長滿至80%~90%（細胞懸液變黃）時，即可進行傳代。
（1）嚴格進行無菌操作，所用一切試劑及耗材均應無菌，且須在無菌超凈工作臺中紫外照射30min以上，以免細胞發(fā)生污染。
（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細胞生存和生長。來源于不同動物種類、組織類型的細胞，對培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時可用預實驗的方法選擇適當的培養(yǎng)液。
（3）胎牛血清對于維持細胞生存，促進細胞生長起著關鍵作用?？筛鶕墨I或預實驗選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應保持用至實驗完成。
（4）消化細胞時應避免消化時間過短導致消化不收集到的細胞數量少，或消化時間過長導致細胞成團塊樣絮狀游離，這時的細胞已有損傷或死亡，影響細胞數量和實驗進度。
（5）細胞離心的時候應避免離心力過小收集的細胞數量不夠，或離心力過大對細胞產生損傷。離心后的細胞沉淀棄去上清后，應先彈散細胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打對細胞損傷小，可以提高細胞活率。
（6）吹打細胞時應盡量避免細胞的產生，以免損傷細胞，影響細胞狀態(tài)（吹打過程中殘留部分液體在吸頭內可以減少氣泡的產生）。
公司正在出售的產品：
GGT2 heavy chain： γ谷酰轉肽酶2重鏈抗體 LILRB3 Others Human 人 LILRB3 / LIR3 / ILT5 / CD85a 人細胞裂解液 (陽性對照)
CL-0116HSC-T6(大鼠肝星形細胞)5×106cells/瓶×2 人血凝素(HA)ELISA 試劑盒 IgM/Cy5.5 Cy5.5標記的兔抗IgM 0.1ml
GGT5 heavy chain： γ-谷酰轉肽酶5重鏈抗體 Hela, 人細胞系 Human
HBdSMC Pellet 人膀胱平滑肌細胞團塊 > 1 mio.cells 人腦膜細胞cDNAHMC cDNA 人血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)ELISA 試劑盒 IgM/Cy7 Cy7標記的兔抗IgM 0.1ml
phospho-GATA3 (Ser115)： 0酸化GATA結合蛋白3抗體 人神經膠質細胞瘤細胞;U251
MDC1： DNA損傷關卡蛋白1抗體 FLT4 Others Human 人 VEGFR3 / FLT4 人細胞裂解液 (陽性對照)
CM-R124大鼠脈絡膜血管細胞培養(yǎng)基100mL 大鼠神經膠質纖維酸性蛋白(GFAP)ELISA 試劑盒 PEDF 大鼠色素上皮衍生因子 96T
Nebulin： 伴肌動蛋白抗體 正常大鼠腎細胞;NRK-52E
U14-GFP(小鼠子細胞) 5×106cells/瓶×2 SW 1088[SW-1088; SW1088](人腦星型膠質瘤細胞) 大鼠神經降壓肽()ELISA試劑盒 TSGF(Mouse Tumor Specific Growth Facter/tumor supplied group of factor) 小鼠特異生長因子/相關因子 96T
NDRG4： 抑癌基因NDRG4抗體 VERO細胞衍生株;SVP
ZR-75-1人乳腺癌細胞ICOS ligand： 誘導協同刺激分子配體CD275抗體 PRMT6 Others Human 人 PRMT6 / HRMT1L6 人細胞裂解液 (陽性對照)
人心肌細胞-RNAHCM-a miRNA5 μg 人c-myc癌基因產物(c-myc)ELISA 試劑盒 Tubulin- Gamma 微管蛋白-γ抗原 0.5mg
IBDV： 雞傳染性法氏囊病病毒抗體 人纖維肉瘤細胞;HT-1080
SVEC4-10(小鼠淋巴結內皮細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 CCL2 / MCP-1 / MCP1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 人Clara細胞分泌蛋白(CC-SP)ELISA試劑盒 TWIST protein peptide TWIST蛋白抗原 0.5mg
IL-17： 白介素-17抗體 腦膜細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)
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