HELF人胚肺成纖維細(xì)胞

細(xì)胞基本屬性：

細(xì)胞詳細(xì)介紹：

傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度，當(dāng)細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)到80%~90%時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶?jī)?nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時(shí)，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過(guò)度。

（5）吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，輕輕吹打混勻，使細(xì)胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間，甚至進(jìn)行細(xì)胞凍存。

二、懸浮細(xì)胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實(shí)驗(yàn)室中懸浮細(xì)胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細(xì)胞碎片的情況下）。當(dāng)在顯微鏡下觀察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長(zhǎng)滿至80%~90%（細(xì)胞懸液變黃）時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

公司正在出售的產(chǎn)品：

Phospho-FLT3 (Tyr842)： 0酸化FMS樣酪酸激酶3 0.1ml

細(xì)胞角蛋白19抗體 人無(wú)色素睫狀上皮細(xì)胞RNAHNPCEpiC miRNA5 μg

CCC-HEK-1細(xì)胞，人胚腎二倍體細(xì)胞 鼠逆轉(zhuǎn)錄酶病毒包裝細(xì)胞,PT67細(xì)胞 CL-0398NCI-H2452(人間皮瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 兔子D二聚體(D2D)ELISA 試劑盒 IgM/PE-Cy7 PE-Cy7標(biāo)記的小鼠抗兔IgM 0.1ml

Phospho-FLT3 (Tyr969)： 0酸化FMS樣酪酸激酶3 0.1ml

細(xì)胞角蛋白16抗體 EFNA2 Others Mouse 小鼠 EFNA2 / Ephrin-A2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

Myotilin： 肌收縮蛋白MYOT抗體 小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-A5

NCI-H524(人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 HUVEC(人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞) 大鼠細(xì)胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISA試劑盒 sE-selectin(Human soluble E-selectin)  人可溶性E選擇素 96T

phospho-MAP4K4(Ser631)： 0酸化原活化蛋白激酶MAP4K4抗體 tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細(xì)胞(B類);P19-CAG-tTA-1F3

IL1B Protein Mouse 重組小鼠 IL-1 beta / IL1B 蛋白 大鼠細(xì)胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISA 試劑盒 sICAM-1(Human Soluble Intercellular Adhesion Molecule-1)  人可溶性細(xì)胞間粘附分子1 96T

RNF59： 環(huán)指蛋白59抗體 PLK1 Others Mouse 小鼠 PLK1 / PLK-1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

HELF人胚肺成纖維細(xì)胞Calu-6細(xì)胞，人退行性癌細(xì)胞 克雷伯肺炎桿菌 敘利亞倉(cāng)鼠腎細(xì)胞;BHK-21 人大皰性類天皰瘡抗體(BP)ELISA 試劑盒 HSP47(Heat shock protein-47) 熱休克蛋白-47抗原 0.5mg

Hepatocyte(2H5)： 人肝細(xì)胞單克隆抗體 ACVR2A Others Mouse 小鼠 ACVR2A / AcIIa 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

雜交瘤(B類);C3110D2E11 人大內(nèi)皮素(Big ET)ELISA 試劑盒 HSP-90 Alpha(Heat Shock Protein 90 Alpha ) 熱休克蛋白90α抗體 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0908

NCI-H1299(人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 甲型流感 H1N1 (A/USSR/90/1977) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 人大腸菌素(colicin)ELISA 試劑盒 HSP-105 (heat sock protein-105) 熱休克蛋白HSP105抗原 0.5mg

Hepcidin-25： 鐵調(diào)節(jié)蛋白/鐵調(diào)素抗體 黑色素細(xì)胞培養(yǎng)基MelM

（1）嚴(yán)格進(jìn)行無(wú)菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無(wú)菌，且須在無(wú)菌超凈工作臺(tái)中紫外照射30min以上，以免細(xì)胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長(zhǎng)。來(lái)源于不同動(dòng)物種類、組織類型的細(xì)胞，對(duì)培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時(shí)可用預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對(duì)于維持細(xì)胞生存，促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)起著關(guān)鍵作用?？筛鶕?jù)文獻(xiàn)或預(yù)實(shí)驗(yàn)選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實(shí)驗(yàn)完成。

（4）消化細(xì)胞時(shí)應(yīng)避免消化時(shí)間過(guò)短導(dǎo)致消化不收集到的細(xì)胞數(shù)量少，或消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán)塊樣絮狀游離，這時(shí)的細(xì)胞已有損傷或死亡，影響細(xì)胞數(shù)量和實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。

（5）細(xì)胞離心的時(shí)候應(yīng)避免離心力過(guò)小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠，或離心力過(guò)大對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀?xiàng)壢ド锨搴螅瑧?yīng)先彈散細(xì)胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小，可以提高細(xì)胞活率。

（6）吹打細(xì)胞時(shí)應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生，以免損傷細(xì)胞，影響細(xì)胞狀態(tài)（吹打過(guò)程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。